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產(chǎn)品展示
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2×Pfu PCR Master Mix(含染料) PCR相關(guān)

  • 型   號:71111
  • 價   格:
  • 更新時間:2025-04-23
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

本產(chǎn)品包含Pfu DNA聚合酶重要手段、dNTPs結構重塑、MgCl2信息化、反應(yīng)緩沖液可靠保障,濃度為2×效果較好。 保真度是Taq酶的54倍法治力量,用于高保真PCR反應(yīng)全技術方案、復(fù)雜模板如GC含量高(>60%), 有二級結(jié)構(gòu)等的擴(kuò)增和大規(guī)模的基因檢測共享。
2×Pfu PCR Master Mix(含染料) PCR相關(guān)

2× PFU PCR Master Mix(含染料)


2×Pfu PCR Master Mix(含染料) PCR相關(guān) 

目錄號:71111

產(chǎn)品內(nèi)容

產(chǎn)品成份

71111-05

71111-0100

2× PFU PCR Master Mix

5x 1ml

100x 1ml

保存條件

-20℃保存信息化,有效期 2 年。經(jīng)常使用生動,可置于 4 °C 保存新型儲能,有效期 3 個月。

產(chǎn)品簡介

本產(chǎn)品包含Pfu DNA聚合酶新品技、dNTPs範圍、MgCl2、反應(yīng)緩沖液紮實做,濃度為2×空間廣闊。 保真度是Taq酶的54倍,用于高保真PCR反應(yīng)提供深度撮合服務、復(fù)雜模板如GC含量高(>60%)服務品質, 有二級結(jié)構(gòu)等的擴(kuò)增和大規(guī)模的基因檢測。

PCR產(chǎn)物為平末端組成部分,純化后可直接用于Blunt載體克隆影響。

本產(chǎn)品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳的過程中;也可經(jīng)過純化處理指導,以用于酶切、連接國際要求、測序等后續(xù)操作。

適用范圍:

高保真DNA擴(kuò)增:如表達(dá)基因的克隆鍛造、基因的定點突變競爭激烈、細(xì)胞內(nèi)基因點突變的分析(SNP)和末端補平。

基因檢測:適合大規(guī)母纳?;驒z測智慧與合力,半定量PCR實驗和微量DNA的檢測。

產(chǎn)品特點

具有快速簡便重要的角色、靈敏度高開放要求、特異性強向好態勢、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,可最大限度的減少人為誤差服務機製。

× Pfu PCR Master Mix 使用說明:

一貢獻力量、配制 PCR 反應(yīng)體系:(于冰上配制)

Component

20 μlReaction

50 μl Reaction

FinalConcentration

2× Pfu PCR Mix

10 μl

25 μ

1 ×

Forward Primer (10 μM)

0.4 μ

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer(10 μM)

0.4 μ

1 μl

0.2 μM

Template DNA

asrequired

as required


ddH2O

up to 20 μl

up to 50 μ


參考模板用量(50 μl 反應(yīng)體系):


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)


質(zhì)粒:0.1-10 ng;細(xì)菌基因組:10-100 ng大幅拓展;人類基因組:50-150 ng發行速度;cDNA:1-5 μl 。

二與時俱進、建議 PCR 循環(huán)條件:

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initialdenaturation

94℃

3 minutes


Denaturation

94℃

10 seconds

 

25-35 cycles

Annealing

55℃

10 seconds

Extension

72℃

0.5-1kb / min

Final Extension

72℃

5 minutes



4-8℃

Hold


注意:如果擴(kuò)增片段≤4 kb性能,建議延伸速度為 1kb / min;片段>4 kb綜合運用,建議 0.5kb / min供給。

注意事項:

a. Pfu酶具有3′-5′的外切酶活性,所以Pfu酶擴(kuò)增時延伸速度比Taq酶低實事求是,應(yīng)根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的長度設(shè)置相應(yīng)的延伸時間進行探討,如果擴(kuò)增片段小于4 kb,建議Pfu酶的延伸速度為1kb/ min等多個領域;如果擴(kuò)增片段大于4 kb再獲,建議延伸速度為0.5kb / min。同時Pfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物應用擴展, 所以應(yīng)先加dNTP后體驗區,再加Pfu酶到反應(yīng)體系中,并立即進(jìn)行PCR反應(yīng)活動上。

b. 用Pfu酶擴(kuò)增時有望,引物的純度要求較高,引物長度大于18個堿基導向作用,Tm在55-80℃ 之間方案,引物濃度在0.1-0.5 μM之間,比Taq酶略高十大行動。

c. Pfu酶的熱穩(wěn)定性比Taq酶好左右,對于GC含量很高的模板,變性溫度可以提高到98℃強化意識,對Pfu酶的活性無影響長期間。

三、結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取 5 µl 反應(yīng)產(chǎn)物現場,瓊脂糖凝膠電泳檢測高端化。

2×Pfu PCR Master Mix(含染料) PCR相關(guān)

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