聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 NobleRyder D0912
北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 NobleRyder D0912量大優(yōu)惠,咨詢 :
聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 NobleRyder D0912
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聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒使用說明書
DNA回收試劑盒使用說明書(PAGE回收)
試劑組成 | 20T | 50T |
溶膠液 | 5ml | 15ml |
結(jié)合液 | 20ml | 50ml |
漂洗液 | 15ml | 15ml |
洗脫液 | 1.5ml | 5ml |
研磨杵 | 20個(gè) | 50個(gè) |
過濾柱 | 20套 | 50套 |
吸附柱 | 20套 | 50套 |
本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和*的緩沖液系統(tǒng),從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA片段品率,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物不斷發展、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)積極影響。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切緊密協作、PCR越來越重要、測(cè)序、文庫(kù)篩
選發揮重要作用、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)醒悟。配以特制的研磨杵和過濾柱數據顯示,使你的操作更方便。
操作步驟:(所有離心步驟均可使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心)
*次使用前請(qǐng)先在15ml漂洗液中加入60ml無(wú)水乙醇能運用。
1達到、將單一的目的DNA條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下(盡量切除多余部分),放入1.5ml離心管中不可缺少,稱取重量蓬勃發展,用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入2倍體積的溶膠液吹打混勻(每100mg膠加入200ul溶膠液)提高鍛煉,75℃水浴30分鐘發展邏輯。
2、用1ml的去尖吸頭吸取混合物至過濾柱中(將膠一起吸入有所提升,溶液過多時(shí)可分次加入)聽得進。13,000rpm離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉(zhuǎn)入新離心管先進水平。
3便利性、取六倍體積結(jié)合液加入原離心管(每100mg膠加入600ul),清洗管壁后加入過濾柱中(溶液過多時(shí)可分次加入)重要平臺,顛倒過濾柱或輕輕吹打幾次混勻深刻認識,13,000rpm離心1分鐘。將兩次收集的濾出液混合應用提升。
4主動性、將總濾出液混勻后加入吸附柱中(溶液過多時(shí)可分次加入),13,000rpm離心30-60秒發展的關鍵,倒掉收集管中的廢液道路,將吸附柱重新放入收集管中。
5真諦所在、向吸附柱中加入600μl漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇)指導,13,000rpm離心30-60秒,倒掉廢液倍增效應,將吸附柱重新放入收集管中規則製定。
6、向吸附柱中加入600μl漂洗液優化服務策略,13,000rpm離心30-60秒關規定,倒掉廢液。
7兩個角度入手、將離心吸附柱放回收集管中建強保護,13,000rpm離心2分鐘,盡量除去漂洗液生產效率。將吸附柱開蓋置于室溫3-5分鐘使命責任,*晾干效果,以防止殘留的漂洗液影響下一步的實(shí)驗(yàn)。
8合規意識、將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中密度增加,向吸附膜中間位置懸空滴加適量65–70℃預(yù)熱的洗脫緩沖液(20-30μl),室溫放置2分鐘體製。13,000rpm離心2分鐘收集DNA溶液構建。
注意:①為了增加回收效率,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中服務延伸,13,000rpm再次離心1分鐘共創輝煌。
②洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于20μl,體積過小影響回收效率進一步。
③洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響大部分。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5之間。
9實際需求、DNA回收產(chǎn)物直接下一步實(shí)驗(yàn)或者-20℃保存解決方案。
注意事項(xiàng):
1、電泳時(shí)使用新的電泳緩沖液善謀新篇,以免影響電泳和回收效果幅度。
2、切膠時(shí)重要的作用,紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,以免對(duì)DNA造成損傷規模最大。
3穩中求進、本試劑盒對(duì)<50bpDNA片段回收效率偏低(30%左右),如想回收最深厚的底氣,應(yīng)加大結(jié)合液的體積協同控製,延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間。
4品質、回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)利用好,初始量越少、洗脫體積越小解決問題,回收率越低系列。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑相互配合、分子生物學(xué)試劑慢體驗、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售智能化、服務(wù)為一體的生物科技公司科技實力,公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等處理;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑重要的、分子克隆相關(guān)試劑開展研究、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器相互融合。