動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒 NobleRyder D0922
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動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒 NobleRyder D0922
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動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒
試劑盒組成 | 50T | 200T | 保存溫度 |
RNaseA(10mg/ml) | 500ul | 2ml | -20℃ |
蛋白酶K(10mg/ml) | 500ul | 2ml | -20℃ |
裂解液 | 12.5ml | 50ml | RT |
結(jié)合液 | 25ml | 100ml | RT |
玻璃奶 | 2.5 | 10ml | RT |
TE緩沖液 | 10ml | 30ml | RT |
原理簡介
本試劑盒適用于動(dòng)物組織及培養(yǎng)的細(xì)胞樣本等特點,用于從中提取基因組DNA顯著。對于尾的可能性,骨等可用不要畏懼,但提取效果一般。*的裂解緩沖液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物質(zhì)問題,并利用玻璃奶吸附DNA逐漸顯現,進(jìn)一步的去掉其他雜質(zhì)全會精神,提取出來,得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR拓展基地,sequencing集中展示,Southern blot,mutant analysis體系流動性,SNP 等下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn)探索創新。
注意事項(xiàng)
1.裂解液低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在熱水中溫浴幾分鐘幫助重新溶解實現了超越,恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用新產品。
2.避免試劑長時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化橋梁作用、pH值變化長遠所需,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
3.RNaseA經(jīng)常使用可放2-8度保存求得平衡,蛋白酶K請放-20度保存紮實做。
4.同一樣本,如果想大量提取至關重要,可以增加樣本量提供深度撮合服務,并且每一步試劑加量,但使用次數(shù)會(huì)成倍減少的發生。
操作步驟
1.取不超過108個(gè)細(xì)胞)組成部分,12,000rpm,離心30秒新的動力,盡可能的吸凈上清技術節能。如果是組織,可用液氮研磨或者盡可能的剪碎廣泛認同,取不超過20mg國際要求,放入離心管中。
2.加入250ul裂解液,立即震蕩混勻,可選做步驟:如需要去除RNA進一步意見,可以加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液,振蕩混勻空白區,室溫放置5-10分鐘。
3.加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液信息化,顛倒混勻形勢,65℃放置10-30分鐘,期間顛倒3-5次,小心內(nèi)心管蓋受熱開啟約定管轄。如30分鐘沉淀無法*消失數據,請注意第6步處理。
4發揮,在上清中加入三倍體積無水乙醇顯著,充分混勻。
5.12000rpm離心5分鐘開放以來,吸去上清占,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul結(jié)合液提供了有力支撐,65℃水浴1-2分鐘激發創作,核酸沉淀可溶解(如無法*溶解,可轉(zhuǎn)移上清到一新的離心管中實事求是,棄沉淀)重要的意義。
6.玻璃奶搖勻。加入50ul搖勻的玻璃奶等多個領域,混勻,室溫放置2分鐘產品和服務,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘應用擴展,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇增多,振蕩混勻活動上,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清進一步推進,70%乙醇重復(fù)洗一次導向作用,再用無水乙醇洗一次。去上清應用的選擇,再次離心2分鐘十大行動,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘(如果玻璃奶加量背景下,請適當(dāng)延長放置時(shí)間綜合措施,此步為去除殘余酒精,以免影響下游實(shí)驗(yàn))自然條件,加入50-100ul TE緩沖液混勻溶解設計標準,65℃水浴5分鐘。離心互動互補,取上清為所提基因組發揮重要帶動作用。
8.電泳或者其他方法檢測,進(jìn)入下游實(shí)驗(yàn)。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)文化價值,是一家專業(yè)從事生化試劑形式、分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)非常重要、銷售進一步提升、服務(wù)為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等營造一處;產(chǎn)品涉及化工原料系統、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑重要意義、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測常用試劑交流等、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。